从法氏囊、肝脏和肾脏三大脏器的病理变化入手,对鸡传染性法氏囊病、鸡新城疫、鸡传染性支气管炎、鸡马立克病、鸡淋巴细胞性白血病、鸡传染性贫血、鸡包涵体肝炎以及鸡真菌毒素中毒症进行鉴别诊断,以期为确诊和有效防控鸡传染性法氏囊病提供参考.
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以及猪肾等细胞培养物中增殖传代,也适应于牛胎肾传代细胞系。BVDV株中有的能引起培养细胞形成空泡及死亡,有的毒株只能培养细胞产生较少的可见变化,感染细胞呈现正常状态。根据这一特性,可将BVDV分为两个生物型,即致细胞病理变化型(cytopathogenic,CP)和非致细胞病理变化型(noncytopathogenic,NCP)(Ridpath JF,2003)。事实上两者在BVDV致病过程中菌发挥着重要的作用传代,牛病毒性腹泻病毒的毒株中有的毒株能引起培养细胞形成空泡及死亡,有的毒株只能使培养细胞产生较少的可见变化.感染细胞呈现正常状态。根据这一特性,可将牛病毒性腹泻病毒分为2个生物型,即致细胞病理变化型(CP)和非致细胞病理变化型(NCP)。事实上,两者在致病过程中均发挥着重要的作用。近年来的研究表明.病毒基因组RNA与宿主细胞的DNA间的重组以及
用PBST连续洗酶标板5次,在吸水纸上甩干。再用豚鼠抗血清稀释液稀释口蹄疫O型病毒豚鼠抗血清至工作浓度(1:1000),加50μL/孔,封板,37℃温育60min。 (5)用PBST连续洗酶标板5次,在吸水纸上甩干。用PBST稀释兔抗豚鼠血清IgG-辣根过氧化物酶结合物至工作浓度(1:500),加50μL/孔,封板,37℃温育60min。 (6)用PBST连续洗酶标板5次,在吸水纸上甩干。加50μL/孔底物溶液(底物溶液务必加双氧水,每1mL加10μL试剂盒配备的3%双氧水),37℃温育15min。 (7)每孔再加50μL终止液终止反应,用酶标仪读取D492nm值。 3.2.3.1.3 结果判定 (1)试验认可标准:每块板设4孔病毒抗原对照,病毒抗原对照不加任何血清,直接用PBST稀释至工作浓度(1:8),与血清/病毒抗原复合物同步加入酶标板孔,50μL/孔。病毒抗原对照D492nm值应在1.5±0.5范围内。阳性对照抗体效价在1:1024±1滴度以内,阴性对照血清抗体效价应<1:8。 (2)血清抗体效价的判定:抗原对照是4孔,弃去最高和最低D492nm值,计算剩余2孔的平均D492nm值,再除以2,即50%对照值。该值即为临界值,表示阻断50%反应的对照D492nm值。以病毒抗原对照平均D492nm值的50%为临界值,被检血清D492nm值大于临界值的孔为阴性孔,小于或等于临界值的孔为阳性孔。某份血清系列稀释中,阳性孔的最高稀释倍数为被检血清的抗体效价。若临界值处于两个稀释孔D492nm值之间,抗体效价取相邻阳性孔和阴性
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